利用HDX技術(shù)監(jiān)測(cè)蛋白質(zhì)高級(jí)結(jié)構(gòu)

氫氘交換質(zhì)譜（HDX-MS）用于研究蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)動(dòng)力學(xué)和構(gòu)型變化，可更好地確定它們的高級(jí)結(jié)構(gòu)。氘是氫的一種重同位素，因此可以通過(guò)質(zhì)譜對(duì)氘含量進(jìn)行測(cè)量或“稱重"。

科學(xué)家們使用HDX-MS研究獲得的信息對(duì)不同“狀態(tài)"的蛋白質(zhì)高級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)行對(duì)比，如對(duì)比與候選藥物結(jié)合前和與結(jié)合后的構(gòu)型變化，定位藥物結(jié)合部位和結(jié)合的強(qiáng)弱。通過(guò)計(jì)算和比較氘交換水平的差別來(lái)獲得蛋白質(zhì)構(gòu)型變化的信息。HDX-MS能夠在溶液中監(jiān)測(cè)蛋白結(jié)合域相互作用情況、蛋白質(zhì)結(jié)合動(dòng)力學(xué)、配體結(jié)合以及蛋白質(zhì)折疊等相關(guān)研究。

HDX-MS研究需要對(duì)蛋白質(zhì)構(gòu)型的微小變化進(jìn)行檢測(cè)，高效率的色譜分離對(duì)達(dá)到高品質(zhì)的數(shù)據(jù)結(jié)果至關(guān)重要。ACQUITY  UPLC M-Class系統(tǒng)更高的耐壓確保了能夠在0℃對(duì)酶切肽段快速進(jìn)行LC分離和質(zhì)譜檢測(cè)。全自動(dòng)HDX-MS系統(tǒng)整合了HDX-MS的所有步驟，包括全自動(dòng)的氫氘交換樣品制備過(guò)程、蛋白質(zhì)序列確定、氘交換曲線以及沃特世*的DyanmX HDX數(shù)據(jù)分析軟件。

同時(shí)發(fā)布的還有沃特世專門開發(fā)的用于用于蛋白質(zhì)“在線酶切"的UPLC色譜柱，即Waters Enzymate BEH在線Pepsin酶切柱，將HDX-MS效果提升到一個(gè)新高度。ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)與Waters SYNAPT G2-Si或Xevo G2-S QTof質(zhì)譜儀聯(lián)用，提供高質(zhì)量的圖譜和數(shù)據(jù)，得到HDX-MS分析所需要的微小質(zhì)量變化。將所有這些創(chuàng)新技術(shù)組合在一起，沃特世提供了完整的且*的HDX-MS分析平臺(tái)。

利用二維分離擴(kuò)展分析動(dòng)態(tài)范圍

對(duì)于復(fù)雜樣品，特別是當(dāng)樣品中的目標(biāo)組分如蛋白質(zhì)、肽或小分子的動(dòng)態(tài)范圍很寬時(shí)，二維LC是非常有用的策略。利用此技術(shù)能夠增加色譜峰容量，具體的操作是先通過(guò)*維分離對(duì)蛋白或肽進(jìn)行分組，所得到的每一個(gè)餾分經(jīng)過(guò)富集，再通過(guò)具有不同選擇性的第二維色譜柱進(jìn)行分離。

ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)采用直觀易用的向?qū)Р藛芜M(jìn)行方法設(shè)置、標(biāo)準(zhǔn)化的色譜柱以及具有高重現(xiàn)性的色譜儀器有效簡(jiǎn)化了2D-LC分離。智能化閥操作增加了樣品通量，同時(shí)zui大程度地提高數(shù)據(jù)質(zhì)量。

有關(guān)ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)的詳細(xì)信息，請(qǐng)?jiān)L問(wèn)www.waters。。ｃｏｍ/mclass。

關(guān)于沃特世公司（www.waters。。ｃｏｍ）

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